7-AMCA Maleimide是一种含有7-氨基-4-甲基香豆素（7-Amino-4-methylcoumarin, 简称7-AMCA）荧光团和马来酰亚胺（Maleimide）活性官能团的荧光标记试剂。它结合了香豆素类染料的优异光学性能与马来酰亚胺的高特异性硫醇反应活性，广泛应用于生物化学和分子生物学领域的蛋白质标记、肽段标记及活性位点研究。

化学结构与性质

化学结构：7-AMCA Maleimide分子包含一个7-氨基-4-甲基香豆素的荧光染料核心，通过一个连接臂与马来酰亚胺基团连接。马来酰亚胺环为五元不饱和环状酰亚胺，具有极强的亲硫醇亲和力。

分子量：约300-400道尔顿，具体视结构差异略有变化。

光学性质：

荧光量子产率较高，发光效率好

溶解性：良好溶于极性有机溶剂如DMSO、DMF，能在缓冲液中适度溶解。

反应特性：马来酰亚胺能选择性与含有巯基（–SH）的分子共价结合，生成稳定的硫醚键

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应用领域

1. 蛋白质及肽段标记

7-AMCA Maleimide专为标记含有游离巯基的氨基酸（主要是半胱氨酸残基）设计。它通过马来酰亚胺官能团与蛋白质或肽链上的硫醇基团发生Michael加成反应，生成稳定的共价连接，避免非特异性标记。

蛋白质结构与功能研究：通过标记特定巯基位点，可研究蛋白质的构象变化、功能域、活性中心等。

酶活性监测：标记酶中活性半胱氨酸残基，分析酶活性调控机制。

肽段修饰：用于多肽的荧光标记，辅助肽的纯化和功能验证。

2. 荧光显微成像与细胞研究

7-AMCA Maleimide标记的蛋白质或肽可用于细胞内定位和成像，尤其适合研究含巯基蛋白质的分布和动态变化。其蓝色荧光波长适合与其他波长荧光染料共用，实现多色成像。

3. 生物传感器与标记工具

利用7-AMCA Maleimide的巯基选择性，常被用作巯基传感器和探针。通过荧光强度的变化，能检测巯基含量及其环境变化，应用于氧化还原状态、蛋白质折叠及病理状态分析。

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